动物脾脏有上百万种B淋巴细胞,当机体受抗原刺激时,具有不同基因的B淋巴细胞合成不同的抗体。
◆ 团队技术骨干拥有数百种单克隆抗体成功研发经历,对质控节点把控精准。
◆ SPF级动物饲养环境,万级细胞房,从源头保障实验稳定性。
◆ 最先进的细胞融合仪,配合专有融合介质,融合率极高,属于高通量筛选平台。
◆ 分步式收费,及时向客户汇报进展,未完成项目不收费,将风险控制至最低。
应用细胞融合技术将B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合,形成杂交瘤细胞,通过筛选,克隆化,选择出既具有分泌抗体功能又能无限增殖的来源于单一B细胞的杂交瘤细胞,该细胞分泌产生均一的、只针对一种抗原决定簇的高特异性抗体,即单克隆抗体。
基于杂交瘤技术制备单克隆抗体需要经过动物免疫、细胞融合、杂交瘤筛选、稳定细胞株建立、抗体生产及抗体纯化等步骤,环球基因建立了一套高效稳定的杂交瘤技术平台,可以满足科研抗体、诊断抗体的研发与生产,以及抗体药物的前期高通量筛选等需求。环球基因可为您提供最优质的单克隆抗体制备服务。
项目 | 实验内容 | 价格 | 周期(周) | 交付内容 |
抗原制备 | 1、客户提供抗原。 | 询价 | 4~6 | 抗原 |
动物免疫及血清效价检测 | 免疫5只BalB/C小鼠,3次免疫后7天进行血清采集及ELISA检测。 | 4000 | 6~8 | ELISA检测报告 |
细胞融合及阳性克隆筛选 | 小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合(电融合),HAT筛选培养(高通量筛选)。 | 15000 | 2 | 10株以上融合后细胞上清 |
稳定细胞株建立 | 选择初筛效价高的阳性克隆(5~10株)进行亚克隆,直至ELISA检测阳性率为100%,扩大培养杂交瘤细胞并冻存。 | 8000 | 4 | 2~5株杂交瘤细胞稳定株(每株2管冻存的细胞)及对应杂交瘤培养上清(5ml/株)。 |
小量抗体制备(二选一) | 1、制备腹水:杂交瘤腹腔注射3只BalB/C小鼠,制备小鼠腹水。2、无血清发酵:200ml无血清发酵小试。 | 1500/株 | 2 | 腹水/无血清发酵液 |
抗体纯化及检测 | Protein A/G纯化小鼠腹水,获得5~10mg高纯度单克隆抗体,进行浓度、纯度及效价检测。 | 1500/个 | 1 | 纯化后抗体 |
其他增值服务 | 杂交瘤抗体基因(可变区)测序 | 7200/株 | 3 | 测序报告 |
抗体亚型鉴定(抗体重链) | 500/株 | 1 | 检测报告 | |
抗体标记(HRP标记) | 1000/株 | 1 | 1~2mg标记后抗体 | |
抗体配对 | 询价 | 1 | 实验报告 | |
5L无血清发酵生产及纯化 | 25000/株 | 5-7 | 纯化后抗体及检测报告 |
项目 | 实验内容 | 价格 | 周期(周) | 交付内容 |
抗原制备 | 1、客户提供抗原。 | 询价 | 4~6 | 抗原 |
动物免疫及血清效价检测 | 免疫10只BalB/C小鼠,3次免疫后7天进行血清采集及ELISA检测。 | 8000 | 6~8 | ELISA检测报告 |
细胞融合及阳性克隆筛选 | 小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合(电融合),HAT筛选培养(高通量筛选)。 | 15000 | 2 | 融合上清ELISA检测报告 |
稳定细胞株建立 | 选择20株强阳性克隆进行亚克隆,直至ELISA检测阳性率为100%,扩大培养杂交瘤细胞并冻存。 | 15000 | 4 | 10株杂交瘤细胞稳定株(每株2管冻存的细胞)及对应杂交瘤培养上清(5ml/株) |
小量抗体制备(二选一) | 1、制备腹水:杂交瘤腹腔注射3只BalB/C小鼠,制备小鼠腹水。 2、无血清发酵:200ml无血清发酵小试。 | 15000/10株 | 2 | 腹水/无血清发酵液 |
抗体纯化及检测 | Protein A/G纯化小鼠腹水/发酵液,获得高纯度单克隆抗体(常规产量5~10mg),进行浓度、纯度及效价检测。 | 15000/10株 | 1 | 纯化后抗体 |
抗体标记及配对筛选 | 抗体标记(HRP标记) | 10000/10株 | 1 | 1~2mg标记后抗体 |
抗体配对(棋盘法筛选) | 3000 | 1 | 抗体配对检测报告 |
1、蛋白抗原:蛋白总量>5mg,浓度>1mg/ml, 纯度>90%,分子量>10KDa,缓冲液为PBS或经环球基因确认对实验无影响的溶液。
2、多肽抗原:多肽总量>5mg,纯度>90%,缓冲液为PBS或经环球基因确认对实验无影响的溶液。
3、其他抗原:咨询。
1. 亚克隆后的稳定细胞株及对应细胞上清
2. 剩余蛋白或多肽
3. 腹水或纯化后抗体(纯度90%以上,ELISA效价大于1: 128000)
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